AAT Bioquest鬼笔环肽(Phalloidin)是一种从毒蘑菇(如鹅膏菌属)中提取的环肽毒素,因其独特的生物学特性,在生命科学研究中具有重要应用。
1. 高特异性结合F-肌动蛋白
靶向性强:选择性结合细胞骨架中的F-肌动蛋白(微丝),几乎不与其他蛋白相互作用,背景干扰极低。
稳定结构:与肌动蛋白结合后,可防止其解聚,维持细胞骨架形态,便于长期观察。
2. 卓越的标记能力
荧光标记兼容性:常与荧光染料(如FITC、TRITC、Alexa Fluor系列)偶联,实现高分辨率显微成像(共聚焦、超分辨显微镜等)。
低浓度有效:纳摩尔级浓度即可清晰标记,减少对细胞活性的影响。
3. 保持细胞活性(活细胞成像)
穿透性改良衍生物:如BODIPY-鬼笔环肽,可通过细胞膜进入活细胞,实现实时动态观察(需优化条件)。
固定细胞首选:对固定后的细胞渗透性极佳,是免疫荧光共定位的理想选择。
4. 高稳定性和信噪比
抗光漂白:部分衍生物(如Alexa Fluor偶联物)耐光性强,适合长时间拍摄。
低背景噪声:特异性结合减少非特异性信号,提升图像质量。
5. 广泛应用场景
细胞形态学研究:清晰显示微丝分布(如伪足、应力纤维)。
疾病机制:研究癌症迁移、神经突触可塑性等。
药物筛选:评估化合物对细胞骨架的影响。
6. 与其他技术的兼容性
可与抗体标记(如微管蛋白、细胞器标记)联合使用,实现多色成像。
适用于3D细胞培养、组织切片等多种样本类型。
注意事项
毒性:天然鬼笔环肽剧毒,需谨慎操作;荧光衍生物毒性较低。
活细胞应用限制:需选择透膜性衍生物,并优化实验条件。
图1.Phalloidin-iFluor®488 Conjugate在荧光显微镜下使用FITC滤镜(绿色)染色HeLa细胞的荧光图像。将细胞固定在4%甲醛中,用线粒体染料MitoLite™Red FX600 (Cat#2677,红色)和Nuclear Blue™DCS1 (Cat#17548,蓝色)共同标记。
图2.用 4%甲醛固定 HeLa 细胞,接着用 Cell Navigator® F-肌动蛋白标记试剂盒(红色荧光)在 Costar 黑色 96 孔板中进行染色的荧光图像。细胞分别用鬼笔环肽-iFluor® 594(货号 23122,红色)和细胞核染色剂 DAPI(货号 17507,蓝色)进行标记。在固定前,细胞内质网(ER)用 ER Green™(货号 22635,绿色)进行染色。
AAT Bioquest鬼笔环肽凭借其高特异性、稳定标记能力和广泛适用性,成为细胞骨架研究中的“金标准”工具,尤其在荧光显微技术中不可或缺。